Инфекционные артриты у лошадей

Вирусный артериит лошадей (Arteriitis viralis equorum, Equine viral arteritis) - контагиозное заболевание, характеризующееся некрозами стенки кровеносных сосудов, катаральным воспалением органов дыхания и пищеварения у жеребят, абортами у кобыл и нарушением воспроизводительной функции у жеребцов.

В других странах вирусный артериит зарегистрирован в Швейцарии (1965), Индии (1965), Австрии (1969), ФРГ (1970), Франции (1976), Польше. Результаты серологических исследований свидетельствуют, что вирус артериита циркулирует в популяции лошадей Российской Федерации и других странах СНГ.

Возбудитель. Вирус представляет собой округлые частицы диаметром 50-70 нм. Содержит изометрический нуклеокапсид диаметром около 35 нм, покрытый липопротеиновой оболочкой, на поверхности которой имеются выступы 12-15 нм высотой. Плавучая плотность вируса в хлористом цезии составляет 1,17-1,20 г/см3.

Геном вируса представлен линейной, односпиральной молекулой плюс РНК, насчитывающей примерно 15 тыс. нуклеотидов. В вирусной оболочке имеется несколько белков с молекулярной массой 16-42 КД, в нуклеокапсиде - один белок с массой 14 КД.

Вирус артериита лошадей согласно решению Международного номенклатурного комитета выведен из состава семейства Тогавирусов и представлен отдельной группой вирусов - род Артериовирусы. Прототипным штаммом возбудителя является шт. Буцирус. Вирус патогенен только для лошадей и не вызывает заболевания у других видов животных, как в естественных условиях, так и в эксперименте. Хотя данные, характеризующие вирулентность вируса, ограничены, очевидно, что эпизоотические штаммы существенно различаются по способности вызывать заболевание. Известен только один серотип вируса. Возбудитель обладает комплементсвязывающим антигеном, не агглютинирует эритроциты. Вирус инактивируется липорастворителями. Быстро разрушается при положительной температуре, но хорошо сохраняется в замороженном состоянии.

Эпизоотология. Несмотря на результаты серологических исследований, свидетельствующих о широком распространении вируса артериита лошадей, во многих странах вспышки инфекции регистрируются редко. Инфекция обычно протекает инаппарантно, без четко выраженных клинических признаков заболевания. Инфицированность лошадей существенно различается по породам. По данным американских исследователей, в США от 70 до 90% лошадей рысистой породы имеют антитела, что является показателем их заражения вирусом.

В стадии острого течения вирусного артериита большое значение имеет аэрогенный путь передачи вируса. Вирус попадает в окружающую среду при кашле с истечениями из носовой полости, где он обнаруживается в высоком титре в течение 7-14 дней.

Источником вируса служат также абортированные плоды, плацента, плодные воды. Передача вируса посредством непрямого контакта через обслуживающий персонал играет незначительную роль.

Вспышка вирусного артериита в Кентукки (США) в 1984 году в основном захватила поголовье рысистых лошадей, но при этом она показала, что большое число случаев отличалось субклиническим течением. Результаты, полученные П. Тимони, В. Макколумом и др., свидетельствовали, что половой путь передачи вируса имеет большое значение в эпизоотологии вирусного артериита. Первоначальное заражение жеребцов часто происходит через респираторный тракт или при случке с инфицированными кобылами с клинической формой заболевания. Инфицированные лошади, поступающие в коневодческие хозяйства с аукционов и ипподромов, также являются источником возбудителя инфекции.

У инфицированных новорожденных жеребят может развиваться быстро прогрессирующая интерстициальная пневмония и фибро-некротические энтериты. У молодых жеребцов до наступления половой зрелости возникает респираторное заболевание, но не поражается тестикулярная ткань и отсутствует длительное носительство возбудителя.

Патогенез. Первичная репликация вируса в организме лошади при аэрогенном заражении происходит в бронхиальных макрофагах. Через 48 часов после заражения вирус обнаруживается в региональных лимфатических узлах. Через 72 часа развивается виремия. В это время вирус проникает в различные ткани и органы лошади. Развитие характерных васкулярных поражений, видимо, начинается в сосудах легкого и потом уже в мелких артериях и венах по всему телу. Вирус также локализуется в эпителиальных клетках семяпроводящих канальцев, в эпителии щитовидной железы и в печени. В течение четырех недель вирус исчезает из органов и тканей, исключение составляют репродуктивные органы жеребцов. Установлено, что возбудитель персистирует в респродуктивных органах жеребчиков раннего возраста, до наступления половой зрелости, в течение 180 дней; у жеребчиков в стадии полового созревания - до1450 дней и у взрослых жеребцов - неопределенное время: от одного месяца до нескольких лет. Поражения, вызываемые вирусом, большей частью обнаруживаются при патологоанатомическом вскрытии лошадей, переболевших с характерными симптомами вирусного артериита. Это отек подкожной клетчатки,"кровенаполненные сосуды, кровоизлияния в различных участках тепа. Местонахождение и характер поражений связаны с нарушением стенки кровеносных сосудов вследствие размножения вируса. При возникновении абортов у эмбрионов, которые обычно имеют признаки частичного аутолиза, могут обнаруживаться интералобулярныи отек легких, диффузная интерстициальная пневмония с серозным выпотом в плевральную и перикардиальную области, отек серозных покровов и множественные кровоизлияния.

Характерные патоморфологические изменения представлены васкулитами, включая вначале мелкие и менее протяженные сосуды - артерии и вены. Первоначальные изменения захватывают эндотелиальные клетки интимы, которые становятся пикнотичными. За этим следуют фибринозные некрозы, лимфоидная инфильтрация стенки сосудов, затем развивается отечность и инфильтрация адвентициума. Тромбы, образующиеся в результате сосудистых поражений, вызванных вирусом, наблюдаются редко, за исключением легких и кишечника. На гистосрезах из органов павших жеребят выявляют интералобулярныи отек, гиперемию и мононуклеарноклеточную инфильтрацию в легких, локально протяженные участки кровоизлияний и некрозов на слизистых оболочках, фибринозный некроз стенок капилляров и артерий в тонком кишечнике, множественные геморрагии и лимфоидно-клеточное истощение.

Иммунитет. У переболевших артериитом жеребят возникает продолжительный иммунитет. В крови иммунных животных обнаруживают в большом количестве нейтрализующие и комплементсвязывающие антитела. Однако половозрелые жеребцы длительное время остаются вирусоносителями, передавая возбудителя через сперму.

Устойчивый иммунитет образуется после прививки лошадям аттенуированного вируса. Животные, которым ослабленный вирус вводили внутримышечно, не передавали его контактным путем другим лошадям. При заражении иммунизированных лошадей различными эпизоотическими штаммами, выделенными в США, была выявлена их иммунологическая однородность.

Время появления нейтрализующих антител у лошадей зависит от вирулентности вируса и наличия иммунитета. Первичный иммунный ответ на введение ослабленного вируса регистрируется между двумя и тремя неделями. Ответ на вирулентный вирус появляется к 10 дню, титр антител быстро нарастает. Вторичный иммунный'ответ в среднем отмечают раньше, чем первичный.

Однократная вакцинация обеспечивает длительный иммунитет, поэтому отпадает надобность в повторном введении вакцины.

Симптомы. Инкубационный период болезни продолжается 3-14 дней при респираторном заражении и 6-8 дней после вагинального инфицирования. Заболевают лошади любого возраста, однако жеребята более восприимчивы.

Вирусный артериит может протекать в острой злокачественной форме, а также в виде хронической или инаппарантной инфекции. В случае острого течения вирусного артериита (которое в настоящее время регистрируется редко, но вполне возможно в случае заноса вируса в неиммунное, ранее не контактировавшее с вирусом поголовье лошадей), наблюдают высокий подъем температуры (до 41 °С) в течение 2-9 дней, учащение пульса, нарушение функций центральной нервной системы: угнетение, парезы лицевого нерва. Температура удерживается почти на одном уровне с незначительными колебаниями. Наблюдают катаральное воспаление слизистых оболочек глаз, носовой и ротовой полостей. Веки у больных лошадей часто опухают. Наблюдаются светобоязнь и слезотечение. Позже в конъюнктивальных мешках скапливается слизисто-гнойный секрет. В некоторых случаях воспаление с конъюнктивы распространяется на роговую оболочку глаза. Кашель, сначала сухой и хриплый, затем влажный. Износовыхотверстий выделяются жидкие, серозные истечения, которые позже переходят в слизистые или слизисто-гнойные. Подчелюстные узлы припухшие и болезненные. В легких прослушивают сухие и влажные хрипы. Развивается отек подкожной клетчатки в области живота, конечностей, особенно задних. У жеребых кобыл происходят аборты на 3-11 месяцах беременности. Плод изгоняется внезапно без видимых предшественников. Другие признаки заболевания вирусным артериитом включают поражение желудочно-кишечного тракта, усиление перистальтики, колики. Обычно у жеребят наблюдают острую быстро протекающую инфекцию без значительного отхода. У жеребят раннего возраста развивается интерстициальная пневмония, в отдельных случаях - фибринозно-некротический энтерит.

Диагностика. Подозрение на вирусный артериит может возникнуть в случае появления острого лихорадочного заболевания, сопровождающегося отеками конечностей, подгрудка, живота; при возникновении у кобыл абортов на 3-10 месяцах жеребости. Диагноз на вирусный артериит устанавливают на основании эпизоотологических, клинических данных и, в случае гибели животных, патоморфологических исследований. Лабораторные методы диагностики включают выделение вируса в культуре клеток, ретроспективные серологические исследования. Для выделения вируса используют культуры клеток лошади, перевиваемых линии ВНК-21, Веро и др. Идентификацию вируса проводят в реакции нейтрализации со специфической сывороткой. Альтернативными (вспомогательными) методами лабораторных исследований являются РСК, ИФА. Полимеразная цепная реакция для диагностики вирусного артериита лошадей, находится на стадии изучения.

Вирусный артериит следует дифференцировать от гриппа, ринопневмонии, инфекционной анемии, отравлений.

Лечение. Этиотропные средства лечения вирусного артериита, как и большинства вирусных болезней, отсутствуют. Больным жеребятам назначают симптоматическое лечение - внутривенно 10%-ный раствор хлористого кальция, препараты камфоры, кофеина. При подозрении на осложнение вирусной инфекции вторичной бактериальной микрофлорой применяют антибиотики и сульфаниламидные препараты.

Профилактика и меры борьбы. Для предупреждения вирусного артериита лошадей запрещают ввоз в благополучное хозяйство (область, регион) подозреваемых в заболевании животных. На всех поступающих лошадей требуют ветеринарное свидетельство, удостоверяющее благополучие по вирусному артерииту хозяйства поставщика.

При ввозе в страну жеребцов для племенных целей необходимо предоставить международный ветеринарный сертификат, подтверждающий, что лошадь не имела клинических признаков заболевания в течение 28 дней до её отправки. Подвергалась двукратному серологическому обследованию (в РН) с отрицательным результатом с интервалом в 14 дней в течение 28 дней, предшествовавших её погрузке. Или исследовалась с отрицательным результатом в возрасте 6-12 мес. Или при получении положительного результата исследования жеребец был спарен с двумя серонегативными кобылами, пробы сыворотки крови которых, полученные до случки и через 28 дней после, были затем исследованы в РН. Доноры спермы должны быть клинически здоровы и подвергаться исследованию в течение года, предшествующего сбору спермы. В случае получения положительного результата ставится биопроба с двумя серонегативными кобылами.

Для специфической профилактики вирусного артериита используют инактивированные и живые вакцины.

Вакцинация лошадей против вирусного артериита должна быть оправдана эпизоотической ситуацией по этой инфекции и экономической целесообразностью.

ВИРУСНЫЙ АРТЕРИИТ ЛОШАДЕЙ ARTERIITIS VIROSA EQUORUM

(Equine viral Arteriitis - англ., Arteriitis virusinfektion der Pferde - нем.)

Вирусный артериит лошадей - остро протекающая инфекционная болезнь, характеризующаяся повышенной температурой тела, лейкопенией, конъюнктивитом, отечностью век, светобоязнью, гиперемией слизистых оболочек, отеками живота и конечностей, некротическими поражениями малых артерий и вен, у кобыл абортами.

Историческая справка. Долл и сотр. (Doll et al., 1957) описали остро протекающую болезнь лошадей на одной ферме штата Огайо (США). По их данным, погибло 30% лошадей и абортировало 50% жеребых кобыл. Эту болезнь они назвали вирусным артериитом лошадей. Позднее они выделили новые штаммы вируса, обладающие серологическим сходством с прототипным штаммом Bucyrus, обозначенным по названию фермы.

До 1965 г. эту инфекцию регистрировали только на территории США. В 1965 г. Бюрки (Biirki) сообщил о выделении вируса от больной лошади во время вспышки болезни в группе 400 лошадей в Швейцарии. Выделенный штамм вируса Bibuna был идентифицирован как вирус артериита лошадей. В 1968- 1969 гг. Бюрки выделил другой штамм вируса артериита - Vienna от лошади, доставленной для лечения в ветеринарную клинику (Австрия).

В 1965 г. Матумото и др. (Matumoto et al.) при серологическом исследовании проб сыворотки лошадей, полученных из Индии, обнаружили довольно высокий уровень нейтрализующих антител к вирусу артериита (цит. по Бюрки, 1969). О наличии инфекции в других странах сообщений нет.

Экономический ущерб может быть значительным. Он определяется высокой летальностью (до 30%), абортами жеребых кобыл, достигающими 50-80% (Долл. и др., 1957; Мак Коллум, 1969), и снижением работоспособности больных животных.

Возбудитель. Вирус артериита лошадей в настоящее время не классифицирован. 5-бром-2-дезоксиуридин не замедляет репродукцию вируса в культуре клеток, хлороформ и эфир инактивируют вирус, что является косвенным доказательством для включения его в группу РНК-овых липовирусов. Попытки культивировать вирус в организме лабораторных животных, на куриных эмбрионах и ге-терологичных культурах клеток были безуспешными (Долл и др., 1957; Мак Коллум и др., 1961).

Первичное выделение вируса возможно только на культуре клеток из органов лошадей. Адаптированные штаммы размножаются в культурах клеток других животных: почки кролика, обезьяны макака резус, хомяка (Уилсон и др., 1962; Бюрки, 1970; Мак Коллум и др., 1970).

В чувствительных культурах клеток вирус размножается, вызывая цитопатические изменения, и накапливается в достаточно высоких титрах. Для культивирования вируса используют среду Игла, содержащую 1-2% сыворотки ягнят. Вирус способен образовывать негативные колонии (бляшки) в культурах клеток под агаровым покрытием, не образует внутриклеточных включений, инак-тивируется жирорастворителями, при низких показателях рН в присутствии солей магния устойчив к трипсину. В инфицированных тканях возбудитель сохраняется в течение шести лет при минус 20°, 75 дней при 4°, быстро погибает при более высоких температурах (Мак Коллум и др., 1961).

Известен только один антигенный тип вируса. Различные штаммы, выделенные в США и Европе, оказались идентичными в антигенном отношении, хотя и различаются по способности размножаться в культурах клеток. Штамм Bucyrus по сравнению со штаммами Bibuna и Vienna лучше размножался в культурах клеток (Бюрки, 1969).

Размер вирусной частицы по результатам фильтрации от 50 до 100 ммк (Бюрки, 1966). По данным Хилсета и др. (Hyllseth et al., 1970) и Магнусона и др. (Magnusson et al., 1970), изучавшим морфологию вируса методом электронной микроскопии, диаметр ви-рионов составляет 50-70 ммк. Форма вирионов сферическая, у некоторых обнаруживали хвостоподобные выступы. Толщина оболочки 3-5 ммк. Внутренняя структура вирионов не различается.

В клетках ВНК-21 через 24 часа после инфицирования обнаруживаются вирусные частицы, отпочковывающиеся во внутриплаз-матических вакуолях и вблизи аппарата Гольджи.

Сформированные частицы внутри этих образований имели средний диаметр 55 ммк с внутренним ядром около 25 ммк.

Эпизоотология болезни. К вирусному артерииту восприимчивы однокопытные. Джонс (Jones, 1969) экспериментально воспроизвел болезнь у жеребят внутривенным, подкожным, интраназаль-ным и интратрахеальным введением крови и плазмы или суспензии легких и селезенки больных лошадей.

В естественных условиях заражение происходит аэрогенным и контактным путями, возможно и алиментарное заражение. Больные лошади служат естественным резервуаром вируса. Других хозяев, в организме которых вирус сохраняется между вспышками болезни, в настоящее время не установлено.

Продолжительность вирусоносительства не изучена. По сообщению Брайенса (Bryans, 1970), болезнь не передавалась кобылам при случке с переболевшими жеребцами, у которых наблюдали типичные признаки болезни и был изолирован вирус. В течение ряда лет ни одна из этих кобыл не подозревается как источник инфекции. Хенсон (Henson, 1970) сообщает, что из тестикулов пони через 14 дней после экспериментально воспроизведенного заболевания выделить вирус не удалось.

Патогенез не изучен. Для вирусного артериита характерно дис-семинированное поражение мелких артерий организма, в особенности слепой и ободочной кишок, легких, капсулы надпочечников, селезенки и лимфатических узлов.

Вирус, проникший в эндотелий сосудов, вызывает развитие воспалительного процесса, сужение и облитерацию просвета - обли-терирующий эндоартериит, часто осложняющийся тромбозом. Дегенеративные поражения, вплоть до некрозов и инфарктов, приводят к отекам внутренних органов, конечностей и живота, а также к абортам жеребых кобыл.

Симптоматика. В естественных условиях болезнь протекает остро и поражает всех животных независимо от возраста и пола. Молодые животные, по-видимому, более восприимчивы к болезни. Клинические признаки характеризуются повышением температуры тела, гиперемией слизистых оболочек носа и конъюнктивы, слезотечением, серозными выделениями из носа, отеками век, конечностей и живота, мышечной слабостью, абортами кобыл и высокой летальностью (Долл и др., 1957).

У экспериментально зараженных животных Джонс (Jones, 1969) наблюдал лихорадку, отсутствие аппетита, слезотечение, конъюнктивит, отек век, серозные выделения из носовой полости (катаральный ринит), затрудненное дыхание, отечность ног и живота, болезненность суставов, поносы и общее депрессивное состояние.

Жеребые кобыли абортируют. Инкубационный период продолжается 1-5 дней, а аборт наступает через 10-33 дня после заражения. Околоплодные оболочки изгоняются вместе с плодом. Примерно у трети больных лошадей наблюдается светобоязнь, помутнение роговицы, кашель, затрудненное дыхание, беспокойство, слабость, шаткая походка.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии павших животных обнаруживают кровоизлияния на плевре и серозных оболочках полостей, отек легких, катаральный и катарально-геморра-гический энтерит и колит, кровоизлияния и инфаркты селезенки, дегенеративные изменения в печени и почках.

При гистологическом исследовании в мелких артериях находят некротические очаги, локализованные в мускульном слое сосудов. Адвентиция отечна и инфильтрирована лимфоцитами. При тяжелой степени поражения изменения обнаруживают в эндотелии и интиме.

В подслизистой оболочке кишечника обнаруживают тромбозы сосудов и инфаркты (Джонс и др., 1957, цит. по Беннодорф, 1968). У абортированных плодов заметны небольшие геморрагии на конъюнктиве, слизистой оболочке носовой и ротовой полостей, зева, трахеи и желудочно-кишечного тракта; на плевре и брюшине - мелкие петехии. Ткани средостения часто отечны, в плевральной полости содержится от 50 до 300 мл серозной прозрачной жидкости. Микроскопические изменения находят в мелких артериях и артери-олах почти всех органов, но главным образом в слепой и ободочной кишках, капсуле надпочечников, селезенке и лимфатических узлах. По данным Хенсона (1970), изменены не только мелкие артерии.

У животных, убитых на 5-6-й день после заражения, бывают поражены вены (панваскулиты). Типичные изменения стенок артерий наступают на 10-й день. Поражение вен в более ранний период связано с интенсивным размножением вируса в селезенке, тогда как изменения в артериях совпадают со временем развития антител и, следовательно, связаны с иммунной реакцией организма. Эта точка зрения подкрепляется наблюдениями Джонса и др. (1957), которые не обнаруживали типичного артериита у плодов-в последней стадии развития.

Диагноз ставят на основании выделения возбудителя в культурах клеток, исследования проб сыворотки от переболевших животных на наличие антител в реакциях нейтрализации и связывания комплемента и проведения гистологических исследований. В отдельных случаях заражают лошадей фильтратом суспензии органов больных или павших животных. Данные эпизоотологии, симптомы болезни и патологические изменения являются вспомогательными, на основании которых можно поставить только предварительный диагноз.

Для выделения вируса используют суспензию ткани селезенки, легких, лимфатических узлов, почек, а также смывы из носовой полости и конъюнктивального мешка больных или павших лошадей. Вирус выделяют пассированием в культурах клеток почек лошадей. Идентификацию выделенного вируса проводят реакцией нейтрализации с использованием заведомо положительной сыворотки. Ее получают от лошадей или пони, которых предварительно прививают вакциной, а затем заражают вирулентным вирусом.

Антиген для РСК можно готовить из экстракта легких или печени абортированных плодов (Долл и др., 1957). Антигеном, не обладающим антикомплементарными свойствами, является очищенная центрифугированием надосадочиая жидкость инфицированной вирусом культуры клеток, обработанной ультразвуком (Бюрки, 1970).

Дифференциальный диагноз. Вирусный артериит необходимо дифференцировать от ринопневмонии лошадей (аборта кобыл) и африканской чумы лошадей. На основании клинических и патологоанатомических признаков различать эти болезни трудно, так как некоторые из них практически сходны. Кроме того, иногда они возникают одновременно в виде моно- или смешанной инфекции.

По данным Мак Коллума и др. (1970), дифференцировать вирусный артериит от африканской чумы лошадей можно постановкой биопробы. Для этого две группы лошадей вакцинируют атте-нуированными штаммами соответственно против африканской чумы и вирусного артериита, а затем заражают исследуемым вирусом. Вирус относят к возбудителю той болезни, против которой вакцинация оказалась эффективной. Однако этот метод дорог и трудоемок.

Опыты, проведенные этими авторами, показали, что между вирусами африканской чумы и артериита отсутствует антигенное родство, поэтому их можно дифференцировать серологически - реакциями нейтрализации и связывания комплемента. Следует, однако, иметь в виду, что вирус африканской чумы лошадей имеет девять основных серотипов, которым присущ общий комплементфиксиру-ющий антиген.

В отличие от вируса ринопневмонии вирус артериита более вирулентен, вызывает значительные поражения внутренних органов и часто гибель животных. При гистологическом исследовании обнаруживают изменения мелких артерий и вен. Ринопневмония, как респираторная инфекция, протекает легко. Часто единственным клиническим признаком болезни являются массовые аборты, которые наступают спонтанно в последней стадии жеребости. В клетках легочной ткани и печени плодов находят внутриядерные включения типа А Каудри.

Лечение. Химиотерапевтических средств лечения нет. Тяжело больным животным назначают симптоматическое лечение.

Иммунитет и специфическая профилактика. У переболевших животных развивается Иммунитет. Для профилактики болезни предложена живая вакцина (Мак Коллум, 1969, 1970). Аттенуация вируса достигнута многократным пассированием в культурах клеток почки лошади (131 пассаж), а затем почки кролика. При внутримышечном введении вакцина вызывает у некоторых животных субклиническую реакцию и повышение температуры тела. После прививки у животных формируются нейтрализующие антитела, которые сохраняются продолжительное время.

Вакцинация жеребых кобыл не отражается на здоровье родившихся жеребят. Вакцинный вирус не передается контактно здоровым лошадям, сохраняет иммуногенные свойства при хранении в течение более трех лет. Лошадей можно прививать в любом возрасте, кобыл в последней стадии жеребости вакцинировать не рекомендуется.

Меры борьбы и неспецифической профилактики должны быть направлены на предупреждение заноса инфекции в хозяйства. Для этого запрещают ввод и вывод лошадей из неблагополучных хозяйств. Больных животных изолируют. Трупы и абортированные плоды сжигают. Помещения тщательно дезинфицируют хлорсодер-жащими растворами. Абортировавших кобыл можно переводить в другие хозяйства не ранее чем через 2 месяца после прекращения абортов.

Указатель литературы

_{Benndorf Е. Die Arteriitisvirusinfektion der Pferde. - In: Handbuch der Virusinfektionen bei Tieren. Band 111 2 Spez. Teil. 2 Jena, 1968, S. 789-791.}

_{Bryans J. Т., Biirki F. Discussion to Part 111. -Proc. 2nd. int. Conf. Equine infectious Diseases, Paris, 1969. Basel-Miinchen-New York, 1970, p. 152-153.}

_{В u r k i F. Further properties of equine arteritis virus. - Arch. ges. Virusforsch., 1966, Bd 19, S. 123-129.}

_{В u г k i F. The virology of equine arteritis. - Proc. 2 nd int. Conf. equine infectious Diseases, Paris, 1969. Basel-Munchen-New York, 1970, p. 125-129.}

_{Isolation of a filtrable agent causing arteritis of horses and abortion by mares. Its differentiation from the equine abortion (influenza) virus. By E. R. Doll, J. T. Bryans, W. H. McCollum, M. E. С г о w е. - Cornell Vet. 1957, v. 47, № 1, p. 3-41.}

_{Hyllseth В., MagnussonP., MarusykH. Studies on equine arteritis virus. - Proc. 2nd int. Conf equine infectious Diseases, Paris, 1969. Basel- Munchen-New York, 1970, p. 140-142.}

_{Jones Т. C. Clinical and pathologic features of equine viral arteritis. - J. Amer. vet. med. Assoc., 1969. v. 155, № 2, Part. 2, p. 315-317.}

_{MagnussonP., Hyllseth В., MarusykH. Morphological studies on equine arteritis virus. -Arch. ges. Virusforsch., 1970, Bd. 30, № 2-3, S. 105-112.}

_{McCollum W. H. Development of a modified virus strain and vaccine for equine viral arteritis. - J. Amer. vet. med. Assoc., 1969, v. 155, № 2, Part 2, p. 318- 322. Discuss., p. 325-326.}

_{Propagation of equine arteritis virus in monolayer cultures of equine kidney. By W. H. McCollum, E. R. Doll, J. C. Wilson, С. B. J о h n s о n. Amer. J. vet. Res., 1961, v. 22, p. 731-735.}

_{McCollum W. H„ Ozawa Y, D a r d i r i A. H. Serologic differentiation between African horse-sickness and equine arteritis. - Amer. J. vet. Res. 1970, v. 31, № 11, p. 1963-1966.}

_{Salle B. Biologic requirements and control of equine viral arteritis vaccine.- J. Amer. vet. med. Assoc., 1969, v. 155, № 2, Part 2, p. 323-325. - Discuss., p. 325-326.}

_{Propagation of equine arteritis virus previously adapted to cell cultures of equine kidney in monolayer cultures of hamster kidney. By J. C. Wilson, E. R. Doll, W. H. McCollum, J. Cheathem, Cornell. Vet, 1962, v. 52, p. 200-205.}

[Equine viral arteriitis (англ.); Infectiose Arteriitis des Pferdes (нем.); Fievretyphoide du cheval (франц.)]

Впервые болезнь описал Долл (1957 г.) на конеферме в США. Болезнь была названа вирусным артериитом лошадей. Авторы выделили штамм вируса — Bucyrus. До 1965 г. эту инфекцию регистрировали только на территории США. Вирус впервые выделили в 1957 г. в США Долл, Брайнс, Мак Коллум и Кроу. В 1965 г. Бюрки выделил подобный вирус (штамм Bibuna) во время вспышки в Швейцарии, а в 1968—1969 гг. автор выделил другой штамм вируса — Vienna в Австралии. В 1965 г.

Мацумото и др. обнаружили В НА к вирусу артрита у лошадей, полученных из Индии. Антитела к вирусу артериита лошадей найдены в среднем у 15 % лошадей во Франции. В Великобритании впервые ВАЛ был зарегистрирован в 1993 г.

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. В Естественных условиях болезнь протекает остро и поражает лошадей независимо от возраста и пола. Она характеризуется повышением температуры тела, гиперемией слизистых оболочек носа и конъюнктивы, слезотечением, серозными выделениями из носа, отеками век, конечностей и живота, мышечной слабостью, абортами и высокой летальностью. Основным клиническим признаком болезни является септицемия. Инкубационный период продолжается 1—5 дней, аборт регистрируют через 10—33 дня после экспериментального заражения. Околоплодные оболочки изгоняются вместе с плодом. Примерно у трети больных лошадей наблюдается светобоязнь, помутнение роговицы, кашель, затрудненное дыхание, беспокойство, слабость, шаткая походка. Заболевают лошади разных пород, с возрастом число больных среди животных увеличивается. Недавно описанные случаи болезни клинически проявлялись лихорадкой, депрессией, конъюнктивитом с отеком вокруг глаз, выделениями из носа. Менее выраженными признаками были отек крайней плоти, грудных желез и дистального отдела конечностей.

При вскрытии павших животных обнаруживают кровоизлияния на плевре и слизистых оболочках полостей, отек легких, катаральный и катарально-геморрагический энтерит и колит, кровоизлияния и инфаркты селезенки, дегенеративные изменения в печени и почках.

При гистологическом исследовании в мелких артериях находят некротические очаги, локализованные в мышечном слое сосудов. Адвентиция отечна. В подслизис-той оболочке кишечника обнаруживают тромбозы сосудов и инфаркты. У абортированных плодов заметны геморрагии на конъюнктиве, слизистой оболочке носовой и ротовой полостей, зева, трахеи, ЖКТ, на плевре и брюшине мелкие петехии. Ткани средостения часто отечны и содержат от 50 до 300 мл серозной прозрачной жидкости. Микроскопические изменения находят в мелких артериях почти всех органов, но главным образом в слепой и ободочной кишках, капсуле надпочечников, селезенке, лимфатических узлах. У животных, убитых на 5—6-й день после заражения бывают поражены вены (панваскулиты). Типичные изменения стенок артерий наступают на 10-й день. Вены поражаются раньше, это обусловлено интенсивным размножением вируса в селезенке, тогда как изменения в артериях совпадают со временем развития AT и, следовательно, связаны с иммунной реакцией организма.

Морфология и химический состав. По Данным фильтрации, размер вирионов от 50 до 100 нм, а электронной микроскопии — 50—70 нм. Форма вирионов сферическая, некоторые из них имеют хвостоподобные выступы. Толщина оболочки 3—5 нм. Внутренняя структура вирионов не различается. Константа седиментации инфекционной PHK48S, мол. м. 4,1106Д, плавучая плотность в Cs2S04 — 1,65 г/см3, а в CsCl — 1,66 г/см3. В вирусе идентифицировано 9 белков (VP1 — VP9). Геном представлен 10 фрагментами 2-нитевой РНК, Белковый капсид его состоит из 7 структурных белков (36—120 кД). Мод. м. трех вирусспецифических белков — VP1, VP2, VP3 — 12000, 14000, 21000 Д соответственно. В наибольшем количестве содержатся белки VP7 и VP8. Белки VP1 — VP6 представляют собой гликопротеины, VP1 является фосфорилированным белком сердцевины вируса. В составе ядра обнаружены РНК И белок VP8. Мутантный клон кДНК (pEBV030F) вируса артерита лошадей (ВАЛ) имеет точечную мутацию, вызывающую замену S2429P в субъединице nsplO (I) репликазы ВАЛ (П). Эта мутация не влияет на протеолитическую активность репликазы, но устраняет функцию субъединицы nsplO в транскрипции. Мутант продуцирует (+)- и (-)-нити субгеномной РНК, но в меньшем количестве, чем ВАЛ дикого типа. Мутация S2429P одинаково влияет на синтез (+)- и (-)-нитей. Это позволило предположить, что субъединица nsplO играет важную роль на ранней стадии транскрипции мРНК ВАЛ. У вируса аретриита лошадей нуклеокапсидный белок N расположен в вирусных комплексах репликации. Это позволяет предположить, что этот белок участвует в синтезе РНК. С использованием инфекционного клона кДНК ВАЛ в геном ВАЛ ввели точечные мутации и делеции, разрушающие экспрессию каждого из структурных генов. Все структурные белки, включая нуклеокапсидный белок, не нужны для репликации генома и транскрипции субгеномных мРНК. Сконструирован мутант ВАЛ, у которого нарушена трансляция внутрилидерной открытой рамки считывания. Этот мутант имеет фенотип дикого типа, так что трансляция внутрилидерной открытой рамки считывания не нужна для цикла репликации ВАЛ.

Геномы ВАЛ двух чистопородных жеребцов, заразившихся во время вспышки вирусного артерита лошадей в шт. Кентукки в 1984 г., и ставших долгосрочными носителями вируса, амплифицированные из спермы этих жеребцов, сравнили с использованием секвенирования шесть открытых рамок считывания (ОРС2—ОРС7) на З'-конце генома, кодирующих четыре известных структурных белка и два не охарактеризованных гликопротеина. Главные варианты популяции ВАЛ, последовательно возникшие в репродуктивном тракте этих жеребцов, изменялись примерно на 1 % в год. Гетерогенность квазивидов ВАЛ увеличивалась в течение долгосрочной персистентной инфекции. Различные ОРС доминантных вариантов ВАЛ эволюционировали независимо. Белок GP3 подвергался во время персистентной инфекции сильному селективному давлению. Аминокислотные замены в вариабельной области VP1, являющейся важным доменом нейтрализации, приводили к появлению вариантов ВАЛ с различными свойствами нейтрализации. Таким образом, эволюция квазивидов ВАЛ во время персистентной инфекции жеребцов могла влиять на фенотипы нейтрализации и вирулентности.

В геноме вируса артерита лошадей (ВАЛ) короткая область между геном репликации и открытой рамкой считывания (ОРС) 2, переименованной в ОРС 2в, содержит 5-конец нового гена (ОРС 2а), консервативного у всех артеривирусов. 33-часть ОРС 2а у ВАЛ перекрывается с 5'-частью ОРС2Ь, кодирующей гликопротеин Gs (I). ОРС 2а и 2Ь экспрессируются из дицистронной мРНК 2. ОРС 2а кодирует новый названный белком оболочки Е (II) очень гидрофобный белок длиной 67 остатков с основным С-концом. С использованием сывороток к белку оболочки Е продемонстрирована экспрессия белка оболочки Е в клетках, зараженных ВАЛ. Белок оболочки Е является очень стабильным, не образует связанные дисульфидной связью олигомеры и не является N-гликозилированным белком оболочки Е, ассоциирован с внутриклеточными мембранами в зараженных ВАЛ клетках при независимой экспрессии. Анализ очищенных частиц ВАЛ показал, что белок оболочки Е является структурным белком. Методами обратной генетики установлено, что гликопротеин Gs и белок оболочки Е существенны для образования инфекционного потомства ВАЛ.

На основе различий нуклеотидных последовательностей ненейропатогенного (Р) и нейропатогенного (С) квазидов артеривируса, повышающего уровень лактатдегид-рогеназы вируса (ПУЛВ), разработан набор праймеров для ПЦР-амплификации, позволяющий различить рекомбинанты между ними в сегменте длиной 1276 н., содержащем открытые рамки считывания (ОРС) 5—7. Мышей заражали большим количеством обоих ПУЛВ, выделяли из плазмы РНК и после обратной транскрипции амплифицировали ДНК с четырьмя наборами смысловых и антисмысловых праймеров, различающих родительские (Р/Р и С/С) и рекомбинантные (Р/С и С/Р) геномные сегменты. Через 1 день после заражения в плазме шести зараженных мышей обнаружили рекомбинанты Р/С и С/Р, частота которых неодинакова у разных мышей, но может достигать 5 %. Секвенирование клонов некоторых рекомбинантов показало, что рекомбинация происходит на участках гомологии между геномами квазивидов Р и С длиной 26—43 н. Секвенирование З'-концевых областей длиной 3157 н. клонов нейропатогенного варианта v нового ненейропатогенного квазивида vx показало, что вариант v является природным рекомбинантом vx, который в результате двойной рекомбинации приобрел область длиной 400 н. на 5'-конце ОРС-5, которая придала ему уникальные свойства ПУЛВ, нейропатогенность и высокую чувствительность к нейтрализации антителами. При смешанной инфекции мышей ПУЛВ-С и ПУЛВ-Р через 7 дней исчезают родитель ПУЛВ-С и все рекомбинанты и персистирует только ПУЛВ-Р.

Вирус чувствителен к эфиру, высокой концентрации трипсина, низкому рН и нагреванию, особенно в присутствии 1М р-ра MgCI2 при 52 °С. В инфицированных тканях при -20 ° вирус сохраняется в течении 6 лет, при 4 °С — 75 дн, быстро погибает при более высоких температурах — в течение 48 ч при 37 °С и 20 мин при 57 °С.

Антигенная активность, антигенная вариабельность и родство. У животных-реконвалесцентов обнаруживают ВНА и КСА. Титр первых у экспериментально зараженных лошадей равен примерно 1:128 и удерживается на этом уровне 4—5 недель, мало снижаясь в течение 31/2 лет. Нейтрализующая активность сыворотки возрастает в присутствии нормальной сыворотки морской свинки. Для РН используют шт. Bucrus. Гемагглютинирующие свойства не установлены.

Продолжительность вирусоносительства и патогенез болезни не изучены. Вирус содержится в тканях мозга, селезенки, почек, печени, легких, бронхиальных и мезен-териальных лимфоузлов и в сыворотке крови в течение 18 дней с момента заражения. У плодовой содержится в легких и селезенке. Вирус выделяют из спермы и гепарини-зированной крови.

Экспериментальная инфекция. Мелкие лабораторные животные и куриные эмбрионы не чувствительны к данному вирусу. Инфекция воспроизводится на жеребятах при внутривенном подкожном, интраназальном, интратрахеальном введениях крови, плазмы, суспензии легких или селезенки больных лошадей. Через 1—5 дней у экспериментально зараженных животных наблюдается лихорадка, потеря аппетита, слезотечение, конъюнктивит, отек век, серозные выделения из носовой полости (катаральный ринит), затрудненное дыхание, отечность ног и живота, болезненность суставов, поносы и общая депрессия. Через 5—10 дней развиваются выраженная панлейкопе-ния, васкулиты, некроз медиальной оболочки мелких артерий. Через 10, а иногда через 33 дня у жеребых конематок происходили аборты. Примерно у 1/3 животных наблюдали светобоязнь, помутнение роговицы, кашель, затрудненное дыхание, беспокойство, слабость, шаткую походку.

Микроскопические изменения находят в мелких артериях и артериолах почти всех органов, но чаще в артериях ободочной кишки, капсуле надпочечников, селезенке, лимфоузлах. Избирательно поражался медиальный слой артериальных стенок. Доказана генетическая передача ВАЛ со спермой жеребца. Вирусом, происходящим из инфекционного клона кДНК ЕА V030H вируса артерита лошадей (ВАЛ), заразили через нос двух здоровых жеребцов. В носовых смывах и моноцитах обоих жеребцов вирусы и РНК ВАЛ обнаружены менее чем через 14 дней после заражения. В сперме одного жеребца ВАЛ и его РНК найдены через 7 дней после заражения. Сероконвер-сия по ВАЛ проявилась через 10 дней, после чего сохранялся высокий титр нейтрализующих антител. Рестрикционный анализ и секвенирование продемонстрировали, что рекомбинант-ный ВАЛ в носовых смывах, моноцитах и сперме жеребцов идентичен исходному ВАЛ из клона кДНК. Анализ клонов, полученных методом гнездовой обратной транскрипции-ПЦР из нескольких образцов показал, что рекомбинантный ВАЛ EAV030H стабилен во время репликации в жеребцах. Эти данные впервые показали, что рекомбинантный вирус, происходящий из инфекционного клона кДНК члена порядка Nidovirales, способен к репликации в животных и генетически стабилен in vivo.

Культивирование. Первичное выделение вируса возможно только на культуре клеток почки и легких лошади. Адаптированные штаммы размножаются в культуре клеток и других животных: почки кролика, обезьяны макака-резус, хомяка. В чувствительных культурах клеток вирус, размножаясь, вызывает ЦП И и накапливается в достаточно высоких титрах. Для культивирования его используют среду Игла, содержащую 3—2 % сыворотки ягнят. Штаммы ВАЛ различаются между собой по способности размножаться в культуре клеток. Так, шт. Bucyrus по сравнению со шт. Bibuna и Vienna лучше размножался в культуре клеток. В культуре клеток ВНК-21/С13, почки 2—7-дневных крольчат или тестикулярных клеток лошадей вирус вызывал образование бляшек. Вирус не образует внутриклеточных включений. Через 24 ч после инфильтрования в клетках ВНК-21 обнаруживали вирусные частицы, которые отпочковываются во внутриплазматических вакуолях вблизи аппарата Гольджи. Методом иммунофлуоресценции показано, что большинство субъединиц репликазы (I) вируса артерита лошадей (ВАЛ) расположено в мембранах в периядерной области зараженных клеток. С использованием антител к репликазе и криоэлектронной микроскопии обнаружены необычные везикулы с двойной мембраной (ВДМ) — предполагаемые места синтеза РНК ВАЛ. Эти ВДМ происходят из спаренных мембран эндоплазмати-ческого ретикулума и формируются в результате образования выступов и отделения везикулярных структур. Такие же перестройки мембран и образование ВДМ наблюдаются при экспрессии кодируемых ORFla субъединиц репликазы альфавирусным экспрессным вектором. Таким образом образование связанных с мембранами строительных лесов для комплекса репликации ВАЛ направляется белками ORFla и не зависит от других белков и синтеза РНК ВАЛ.

Источники и пути передачи инфекции. Больные лошади — единственный резервуар вируса. В естественных условиях заражение происходит аэрогенным и контактным путем, возможно и алиментарное заражение. В естественных условиях восприимчивы однокопытные.

Иммунитет и специфическая профилактика. У переболевших животных развивается иммунитет, продолжительность которого не изучена. Для специфической профилактики предложена живая вакцина, представляющая собой аттенуированныи вирус 131-го пассажа в культуре клеток почки лошади и затем почки кроликов и конечной адаптацией вируса к клеточной линии лошадиного дермиса (NBL-6). Инокуляция вакцины не вызывает клинического проявления болезни. Лошадей можно прививать в любом возрасте, кобыл не рекомендуют вакцинировать в последней стадии жеребости. Вакцинный вирус не передается контактно здоровым лошадям. Формолвакцина против ВАЛ оказалась достаточно эффективным препаратом. Разработана вакцина для индукции протективного иммунитета против инфекции, вызываемой артериви-русами, состоящая из артеривируса с модификацией в нуклеотидной последовательности, позволяющей отличать животных, вакцинированных данной вакциной, от животных, инфицированных артеривирусами дикого типа или же вакцинированных немодифицированным штаммом артеривируса.

После вспышки 1993 г. клинических случаев вирусного артериита лошадей в Великобритании не наблюдали, но меры профилактики и контроля не прекращались. С 1993 г. в этой стране широко используется, особенно для жеребцов убитая вирус вакцина. Особое внимание обращается на вирусоносительство у неиммунизированных серологически положительных жеребцов. Установлено, что в 1995 и 1996 гг. серологически положительно реагировали 2 % лошадей.