Для фиксации костного мозга не используют
3.10. Для выявления зернисто-сетчатой субстанции ретикулоцитов рекомендуется краситель:
А. бриллиант - крезиловый синий
Г. метиленовый синий
Д. все перечисленное верно
3.11. Увеличение количества ретикулоцитов имеет место при:
А. апластической анемии
Б. гипопластической анемии
В. гемолитическом синдроме
Г. метастазах рака в кость
Д. все перечисленное верно
3.12. Не сопровождается повышением количества ретикулоцитов в периферической крови:
А. гемолитическая анемия
Б. постгеморрагическая анемия
В. анемия при лучевой болезни
Г. мегалобластные анемии на фоне лечения
Д. все ответы правильные
В. этиловый спирт 96%
Г. этиловый спирт 70%
Д. фиксатор-краситель Лейшмана
3.16. Для окраски мазков крови применяются методы:
Б. по Паппенгейму
Г. все перечисленные методы
3.17. Гемоглобин можно определять методом:
Г. всеми перечисленными методами
Д. ни один из перечисленных
3.18. Наиболее точным и практически приемлемым методом определения содержания гемоглобина в крови является:
Б. метод с 0,5% раствором аммиака по оксигемоглобину
В. гемиглобинцианидным метод
Г. по насыщению крови газом (СО, О2)- газометрический метод
Д. определения содержания кол-ва железа в молекуле Н b
3.19. Увеличение гемоглобина в крови наблюдается при:
А. первичных и вторичных эритроцитозах
Б. мегалобластных анемиях
Д. все перечисленное верно
3.20. Под абсолютным количеством лейкоцитов понимают:
А. процентное содержание отдельных видов лейкоцитов в лейкоформуле
Б. количество лейкоцитов в 1 л. крови
В. количество лейкоцитов в мазке периферической крови
Г. все ответы правильные
Д. все ответы неправильные
А. увеличение процентного содержания нейтрофилов при нормальном абсолютном их количестве
Б. увеличение процентного и абсолютного содержания нейтрофилов
В. увеличение их абсолютного числа
Г. уменьшение процентного содержания нейтрофилов
Д. все ответы неправильные
3.22. Появление в периферической крови бластов на фоне нормальной лейкоформулы характерно для:
А. мегалобластной анемии
Б. заболеваний печени и почек
В. состояния после переливания крови
Г. острых лейкозов
Д. все перечисленное верно
3.23. Подсчет клеток в гематологических анализаторах основан на следующем принципе:
В. светорассеивания лазерного луча
Г. действий клеточных лизатов
Д. все перечисленное верно
3.24. Молекула гемоглобина состоит из:
А. протопорфирина и железа
Б. порфирина и железа
В. гема и глобина
Г. глобина и железа
Д. протопорфирина и глобина
3.25. Гем представляет собой соединение железа с:
Г. порфирином и белком
Д. протопорфирином и белком
3.26. Повышение гематокритной величины наблюдается при:
Г. все перечисленное верно
Д. все перечисленное неверно
3.27. Лейкоцитоз наблюдается при:
А. аплазии и гипоплазии костного мозга
Г. лучевой болезни
Д. все перечисленное верно
3.28. Показатель RDW , регистрируемый гематологическими анализаторами, отражает изменение:
А. радиуса эритроцитов
Б. количества эритроцитов
В. насыщение эритроцитов гемоглобином
Г. различия эритроцитов по объему (анизоцитоз)
Д. количества лейкоцитов в крови
3.29. Подсчет мегакариоцитов костного мозга следует проводить в:
А. камере Горяева
Б. камере Фукс-Розенталя
В. любой из перечисленных камер
Г. мазке периферической крови
Д. счетчиках клеток крови
3.30. Стволовая кроветворная клетка обладает:
А. полипотентностью - способностью к дифференцировке по различным линиям кроветворения
Б. цитохимической инертностью
В. свойством регулировать кроветворение
Г. способностью к самоподдержанию
Д. всеми перечисленными свойствами
3.31. Стволовая клетка кроветворения в покое имеет морфологию:
А. малого лимфоцита
Б. бластной клетки
Д. ни одного из перечисленных
3.32. К элементам микроокружения костного мозга относятся:
А. ретикулярные клетки
Г. остеобласты и остеокласты
3.33. Клетки стромы костного мозга выполняют:
А. регуляцию гемопоэза
Б. опорную (механоциты)
В. функцию микроокружения
Г. трофическую функцию
Д. все перечисленное
3.34. Для эритробластов характерно:
А. изменение цвета цитоплазмы (базофильная, оксифильная) в зависимости от гемоглобинизации
Б. отсутствие нуклеол в ядре
В. различный размер клетки, в зависимости от ее зрелости
Г. колесовидная структура хроматина ядра с последующей пикнотизацией
Д. все перечисленное
3.35. Среди клеток костно - мозгового пунктата эритробласты составляют в среднем:
3.36. Лейко–эритробластический индекс это:
А. отношение всех видов костного мозга ко всем клеткам эритроидного ряда
Б. отношение зрелых форм лейкоцитов ко всем клеткам эритроидного ряда
В. отношение незрелых лейкоцитов ко всем клеткам эритроидного ряда
Г. отношение эритроцитов к лейкоцитам периферической крови
Д. все ответы правильны
3.37. В норме лейко-эритробластический индекс в среднем составляет:
Д. отношение не нормируется
3.38. Увеличение бластов при клеточном или гиперклеточном костном мозге характерно для:
А. фолиеводефицитной анемии
Б. острой кровопотери
В. острого лейкоза
Г. инфекционного мононуклеоза
А. формы эритроцитов
Б. диаметра эритроцитов
В. интенсивности окраски эритроцитов
Г. количества эритроцитов
3.40. Анизоцитоз эритроцитов наблюдается при:
А. макроцитарных анемиях
Б. миелодиспластических синдромах
В. гемолитических анемиях
Д. всех перечисленных заболеваниях
3.41. Мегалобластический эритропоэз наблюдается при:
А. кризе аутоиммунной гемолитической анемии
В. В-12-фолиеводефицитной анемии
Д. всех перечисленных состояниях
3.42. Клетки мегалобластического ряда отличаются от клеток эритробластического ряда:
А. большим размером
Б. отсутствием радиальной исчерченности ядра
В. обильной цитоплазмой
Г. ранней гемоглобинизацией цитоплазмы
Д. всеми перечисленными признаками
3.43. Гранулоциты образуются в:
Б. костном мозге
В. лимфатических узлах
Г. селезенке и лимфатических узлах
3.44. Тромбоциты образуются в:
Б. костном мозге
В. лимфатических узлах
Г. все ответы правильные
Д. правильного ответа нет
3.45. Повышенное количество сидероцитов в периферической крови и сидеробластов в костном мозге обнаруживается при:
Б. отравлении свинцом
В. железодефицитных анемиях
Г. миеломной болезни
Д. гемолитической анемии
3.46. В основу работы большинства гематологических анализаторов положены:
А. метод Культера
Б. кондуктометрический метод
В. импеданстный метод
Г. все выше перечисленные методы являются синонимами
Д. у каждой фирмы свой метод
3.47. Абсолютное увеличение количества базофилов в периферической крови характерно для:
А. острых лейкозов
Б. хронических миелопролиферативных заболеваний
В. аллергических состояний
Г. лечения эстрогенами
Д. все перечисленное верно
3.48. Абсолютный нейтрофилез характерен для:
А. апластической анемии
Б. лечения цитостатиками
Г. хронических бактериальных инфекций
Д. все перечисленное верно
3.49. Относительный лимфоцитоз наблюдается при:
Б. хроническом миелолейкозе
В. приеме кортикостероидов
Г. вторичных иммунодефицитах
Д. злокачественных новообразованиях
3.50. Абсолютный моноцитоз характерен для:
А. бактериальных инфекций
Б. заболеваний, вызванных простейшими
Г. моноцитарного и миеломоноцитарного лейкозов
Д. все перечисленное верно
3.51. Тромбоцитопения характерна для:
А. краснухи новорожденных
Б. лучевой болезни
Д. все перечисленное верно
3.52. Плазмоциты (2-4%) в периферической крови обнаруживают при:
А. вирусных инфекциях
Б. состоянии после облучения
Д. все перечисленное верно
3.53. Клетки Березовского-Штернберга и Ходжкина в лимфоузлах- основные диагностические элементы:
Г. острого лейкоза
Д. все перечисленное верно
3.54. В гемограмме: гемоглобин 100г/л; эритроцитов 3,4 млн. литров; лейкоцитов 36 тысяч литров; бластных клеток 42%; миелоциты 5%; метамиелоциты 1%; палочкоядерных 2%; сегментоядерных 20%; лимфоцитов 12%; моноцитов 8%. Эта гемограмма характерна для стадии хронического миелолейкоза:
Д. ни одной из перечисленных
3.55. В гемограмме: гемоглобин 130г/л; эритроцитов 3,9 млн. литров; лейкоцитов 12тысяч литров; миелоцитов 3%; метамиелоцитов 1%; палочкоядерных 5%; сегментоядерных 60%; эозинофилов 5%; лимфоцитов 21%; базофилов 1%; моноцитов 6%. Эта гемограмма характерна для стадии хронического миелолейкоза:
Г. бластного кризиса
Д. ни одной из перечисленных
3.56. В гемограмме: гемоглобин 110г/л; эритроцитов 3,7млн. литров; лейкоцитов 250 тысяч литров; миелобласты 4%; промиелоциты 2%; миелоциты 22%; метамиелоциты 7%; палочкоядерные 16%; сегментоядерные 35%; эозинофилы 5%; базофилы 2%; лимфоциты 4%; моноциты 3%; эритробласты 2на100 лейкоцитов. Эта гемограмма характерна для стадии хронического миелолейкоза:
Г. бластного кризиса
Д. ни одной из перечисленных
3.57. В гемограмме: гемоглобин 120г/л; эритроцитов 3,7 млн. литров; лейкоцитов 40 тысяч литров; миелобластов 2%; миелоцитов 15%; метамиелоцитов 4%; палочкоядерных 17%; сегментоядерных 11%; эозинофилов 7%; базофилов 36%; лимфоцитов 6%; моноцитов 2%. Эта гемограмма характерна для стадии хронического миелолейкоза:
Г. бластного кризиса
Д. ни одной из перечисленных
3.58. Лейкоцитоз, обусловленный появлением бластов, выраженная нормохромная анемия, тромбоцитопения в периферической крови и гиперклеточный костный мозг с большим количеством бластов (60%) характерны для:
А. острого лейкоза
Б. хронического миелолейкоза
В. хронического лимфолейкоза
Д. миеломной болезни
3.59. Гиперлейкоцитоз, абсолютный лимфоцитоз, умеренная нормохромная анемия, в костном мозге до 70% лимфоцитов характерно для:
А. острого лейкоза
Б. хронического лимфолейкоза
Г. миеломной болезни
Д. хронического моноцитарного лейкоза
3.60. Выраженная анемия, лейкопения, нейтропения, единичные плазматические клетки в периферической крови, плазмоцитоз в костном мозге. Цитологическая картина характерна для:
А. острого лейкоза
Б. хронического миелолейкоза
В. миеломной болезни
Г. хронического лимфолейкоза
3.61. Лейкоцитоз за счет незрелых гранулоцитов, миелобластов, промиелоцитов, миелоцитов, метамиелоцитов характерен для:
А. острого лейкоза
Б. хронического миелолейкоза
Д. всех перечисленных заболеваний
3.62. Прогрессирующая нормохромная анемия, нормальное количество лейкоцитов, в лейкограмме миелобласты. В костном мозге большое количество эритробластов, мегалобластов, миелобластов. Гемограмма характерна для:
Г. хронического миелолейкоза
Д. миеломной болезни
3.63. Костный мозг клеточный Л/Э=1/2; эритропоэз нормобластический; индекс созревания эритробластов =0,4. индекс нейтрофилов =0,9. Такая картина костного мозга характерна для:
А. острой постгеморрагической анемии в фазе костномозговой компенсации
Б. хронической постгеморрагической анемии
В. В12- дефицитной анемии
Г. гемолитической анемии
Д. всех перечисленных анемий
3.64. Костный мозг клеточный, индекс Л/Э =1/2, выраженная гиперплазия эритробластов, нормобластический тип кроветворения, индекс созревания эритробластов =0,8, индекс созревания нейтрофилов =0,9, мегакарио - цитарный росток неизменен. Пунктат костного мозга характерен для:
А. острой постгеморрагической анемии в фазе костномозговой компенсации
Г. начальной фазы острой постгеморрагической анемии
Д. всех перечисленных анемий
ОТВЕТЫ - РАЗДЕЛ 3. ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. -Г 3.19. -А 3.37. -В 3.55. -А 3.73. -Б 3.91. -Д 3.109. -А 3.127. -Д
3.2. -Д 3.20. -Б 3.38. -В 3.56. -Б 3.74. -Д 3.92. -Г 3.110. -Д 3.128. -В
3.3. -Д 3.21. -А 3.39. -Б 3.57. -В 3.75. -А 3.93. -Б 3.111. -Д 3.129. -Д
3.4. -Д 3.22. -Г 3.40. -Д 3.58. -А 3.76. -Б 3.94. -Г 3.112. -Д 3.130. -В
3.5. -Б 3.23. -А 3.41. -Д 3.59. -Б 3.77. -А 3.95. -А 3.113. -А 3.131. -А
3.6. -Г 3.24. -В 3.42. -Д 3.60. -В 3.78. -Д 3.96. -Д 3.114. -А 3.132. -А
3.7. -Д 3.25. -А 3.43. -Б 3.61. -Б 3.79. -А 3.97. -В 3.115. -Б 3.133. -Д
3.8. -Д 3.26. -А 3.44. -Б 3.62. -Б 3.80. -А 3.98. -А 3.116. -Б 3.134. -Г
3.9. -Д 3.27. -В 3.45. -Б 3.63. -Б 3.81. -Г 3.99. -Д 3.117. -В 3.135. -А
3.10. -А 3.28. -Г 3.46. -Г 3.64. -А 3.82. -В 3.100. -Г 3.118. -Д 3.136. -А
3.11. -В 3.29. -Б 3.47. -Б 3.65. -Г 3.83. -Г 3.101. -А 3.119. -А 3.137. -Д
3.12. -В 3.30. -Д 3.48. -В 3.66. -Д 3.84. -А 3.102. -В 3.120. -Г 3.138. -В
3.13. -Д 3.31. -А 3.49. -А 3.67. -Б 3.85. -Г 3.103. -Д 3.121. -Д 3.139. -Б
3.14. -А 3.32. -Д 3.50. -Г 3.68. -Г 3.86. -Б 3.104. -А 3.122. -В 3.140. -Г
3.15. -Г 3.33. -Д 3.51. -Д 3.69. -А 3.87. -Д 3.105. -Д 3.123. -Г 3.141. -Г
3.16. -Г 3.34. -Д 3.52. -Д 3.70. -В 3.88. -Г 3.106. -Б 3.124. -Д 3.142. -Г
3.17. -А 3.35. -В 3.53. -А 3.71. -В 3.89. -Д 3.107. -Д 3.125. -А 3.143. -А
3.18. -В 3.36. -А 3.54. -Г 3.72. -Д 3.90. -В 3.108. -Б 3.126. -Д 3.144. -Г
После клинического обследования и исследования периферической крови морфологическое изучение костного мозга составляет первостепенный тест в процессе выявления ряда гемопатий.
С исторической точки зрения исследование костного мозга прошло следующие 3 этапа:
а) гистологический — основывающийся на исследовании костного мозга в срезах костей. Исходно фрагменты костей отбирали из трупов, далее путем прижизненной трепанации;
б) цитологический — основывающийся на исследовании костномозговых клеток, отбираемых путем отсасывающей пункции грудины. После ее внедрения Аринкиным пункция грудины распространилась очень быстро, ей отдавалось предпочтение в ущерб трепанации. Эта техника привела к существенному прогрессу гематологии, поскольку предоставляла возможность описания костномозговых клеток и различных видов гемопатий. В связи с простотой и практическим характером отсасывающей пункции врачи отказались от биоптического отбора костного мозга. Вот почему долгое время гематология носила отпечаток чисто цитологического толкования костномозговых сдвигов, не учитывая изменения стромы;
в) цитогистологический — в основе которого лежит исследование костного мозга, как с цитологической точки зрения, на отпечатках или мазках размозженных комочков, так и с архитектурной точки зрения — на срезах. Срезы костного мозга получаются из фрагментов костей, отбираемых путем биоптической пунк-кии, или после гистологической обработки костномозговых комочков, отобранных при отсасывающей пункции.
Сопоставление цитологического и гистологического аспектов костного мозга необходимо для диагностики и прогноза многих гемопатий.
Показания к отсасывающей пункции костного мозга. Исследование костного мозга показано во всех случаях локализации в нем патологического процесса. Постановка диагноза возможна всегда, когда поражение костного мозга неодинаково, частично. Отсасывающая пункция преследует диагностическую цель в случае заболевания мегалобластической анемией, множественной миеломой, острой алейкемической лейкемией, панцитопенией, болезнями Гоше, Нимана-Пика, Кала-азар, генуинной тромбоцитопенической пурпурой и пр.
Существуют болезни, при которых исследование костного мозга не проводится с абсолютно диагностической целью, но представляется необходимым для уточнения причины или отдельных состояний, которые могут возникнуть во время их течения, например, железодефицитная анемия — для исследования гемосидерина, хроническая гранулоцитная лейкемия — для определения кариотипа или выявления бластического приступа, гемолитическая анемия при апластическом приступе, микроангиопатическая анемия — для выявления карциноматозного метастаза, лимфомы и пр.
Отсасывающая пункция составляет наиболее простой и быстрый метод исследования костного мозга. Эта техника основывается на тот факт, что нормальный костный мозг находится в полужидком состоянии, в связи с чем его диагностический отбор не представляет затруднений.
Для пункции используются стальные неокисляющиеся иглы различных видов, длиной от 3 до 5 см и диаметром просвета 1—2 мм. Предпочтение отдается коротким негибким иглам, без регулируемого упора с коротким срезом иглы и хорошо заостренным концом. местом отбора отсасываемой пункции у взрослого человека тело грудины, на уровне межреберных пространств II или III. В порядке частоты также могут быть использованы дужки, гребень подздошной кости, остистые отростки поясничных позвонков.
У детей пункция делается в подвздошную кость, а до двухлетнего возраста — в большеберцовое плато или пяточную кость.
После дезинфекции срединогрудиной зоны йодированным спиртом обезболивается место пункции 5—6 мл 2% ксилина. Исходно инфильтрируется кожа, затем последовательные слои до надкостницы, в которую впрыскивается большее количество обезболивающего средства Такой прием способствует определению толщины мягких слоев в виду последующей собственно пункции. До пункции не требуется назначение успокаивающих средств, даже когда речь идет о беспокойных больных Достаточна психическая подготовка, заключающаяся в уверенности больного о необходимости мероприятия и в частности об отсутствии какой-либо опасности.
После проникновения в костномозговую полость удаляется мандрен и приспосабливается сухой, плотно прилегающий шприц на 5 или 10 мл.
Обратить внимание больного на то, что в момент отсасывания он ощутит резкую боль. Отобрать 0,5—1,5 мл костного мозга. Боль, вызываемая смещением костномозговой ткани в момент отсасывания, колеблется в зависимости от чувствительности данного больного и, в частности, от качества отсасываемого материала. Извлечение многочисленных костномозговых фрагментов вызывает острую боль, в то время как отсасывание жидкости без комков, лишено боли.
После отсасывания костного мозга снять шприц и передать помощнику. Затем вынуть иглу, наложить стерильный компресс и попросить больного придушить ладонью место пункции. Из отобранного пункцией материала часть выкладывается на предметное стекло, а другая часть вливается в маленький баллон, содержащий сухой Na2ЭДТА. В случае необходимости одновременно распределить костный мозг в специальную посуду в целях цитогенетического, ауторадиографического и/или электронномикроскопического исследования.
Обработка отобранного материала отсасывающей пункцией костного мозга. Предметное отекло, на которое нанесен костный мозг быстро наклонить, при этом стекает жидкость и можно отделить комочки. Из полученного таким образом материала делаются различные препараты. В том числе:
1. Тонкие мазки из костномозговой жидкости, растягиванием с помощью отшлифованного стекла, подобно мазкам периферической крови.
2. Мазки размозженных комочков. Углом стекла оттянуть один или несколько фрагментов, оставшихся на верхней части предметного стекла, размозжить их между двумя пластинками, расположенными перпендикулярно одна на другую, при этом прикладывается небольшое но однородное давление. Все препараты высушиваются быстро помахиванием пластинок в воздухе одним из помощников. Окраски мазков паноптиче-ская, по методу Май-Грюнвальд-Гимза, также цитохимическая для выявления гемосидерина, гликогена, пероксидаз, ЩФЛ и пр.
3. Гистологические срезы путем концентрации, закрепления и включения комочков. Крупные белесые фрагменты костномозговой ткани собрать углом или кромкой предметного стекла и оттянуть их к верхнему концу наклоненной пластинки, подождать пока костномозговая жидкость стечет полностью. После свертывания, фибрин связывает фрагменты костномозговой ткани, образуя общую массу; последнюю бережно переложить с пластинки в посуду с закрепляющей жидкостью.
После 4—24 часового закрепления включить в парафин и образовать срезы толщиной 7—10 мк. Окрасить гематоксилин-эозином, по Гимзу, Ван Гизону и аргирофильной окраской для ретикулина.
Материал, отобранный в баллон с сухим противосвертывающим веществом можно использовать для прямого подсчета: миелокариоцитов в гемоцитометре, миелокрита и приготовления мазков из костномозгового концентрата.
Синаптическая передача сигнала между аксоном одного нейрона (слева) и дендритами другого (справа)
Звучит смешно, но если задуматься - жутко.
"Любимец партии" т.Богданов занимался ровно тем же, старался сохранить вечную молодость путем переливанием себе крови от молодых здоровых людей (история умалчивает, где он их брал). Умер на столе во время одного из таких переливаний. Из его "переливателей" в дальнейшем был сформирован Центральный Институт Переливания Крови.
Между прочим вполне действенно (не омоложение конечно, но кое что получается)
Фрицы "баловались" этим в ВОВ, набирали детей с окупированных территорий, и делали регулярное переливание крови своим раненым - заживление и восстановление организма увеличивалось в пару раз. Причем не только заживление ран, но и восстанавливались почки\печень, другие органы, если были изношены.
Эксперименты такого рода конечно абсолютно бесчеловечны и всех экспериментаторов желательно ставить к стенке, но тем не менее результат был.
В одну корзину яйца не кладут. Генетики шуршат в своем направлении и вполне возможны пересекающийся достижения. Другой вопрос, сравнивание мышей и людей, у людей механизмов в цепи днк побольше.
Мозг имплантом не заменишь. Ну будешь ты кидаться танками, что толку, если в 85 Альцгеймер превратит тебя в овоща?
К мозгу, теоретически можно впаять имплант для вайфая. Этож наука, она ползет потихоньку, но ползет.
Замедление старения и его обращение вспять
Дерек побывал в морской лаборатории Бодега, где исследуют ушастых аурелий, чтобы понять механизмы клеточной регенерации медуз и их способности к возвращению клеток к состоянию в начале жизненного цикла в виде полипа.
А также ведущий пообщался с профессором Синклером, придерживающимся эпигенетической теории старения. Учёный рассказал об успехах омоложения пожилых мышей с помощью никотинамидмононуклеотида или NMN. И поделился прорывом в области генной инженерии на примере восстановления зрения у пожилой мыши с заболеванием сетчатки с помощью репрограммирования взрослых клеток.
В общем, как всегда, неизвестно, возможно ли замедлить старение человека, чтобы продлить здоровую жизнь до 120-150 лет или даже обратить процессы увядания, но видео интересное.
Человек после трансплантации обнаружил, что его ДНК изменилась
Через три месяца после трансплантации костного мозга Крис Лонг из Рино, штат Невада, узнал, что ДНК его крови изменилась, после того, как его коллега из офиса шерифа, где он работал, посоветовала ему сделать анализ.
Четыре года спустя после операции, изменилась не только кровь Лонга. В мазках на его губах и щеках содержалась ДНК донора. Еще более удивительным для Лонга и других коллег из криминалистической лаборатории было то, что ДНК в его сперме также принадлежала донору. "Я думал, что могу исчезнуть и появится кто–то другой", — сказал он.
Десятки тысяч людей ежегодно проходят операцию трансплантации костного мозга для лечения рака крови и других заболеваний крови, включая лейкемию, лимфому и серповидноклеточную анемию. Хотя маловероятно, что кто–либо из них окажется виновником или жертвой преступления, но это заинтриговало коллег Лонга из департамента шерифа округа Вашо, которые использовали своего коллегу из IT–отдела как подопытного кролика.
Последствия дела Лонга, которое было представлено на международной судебно–экспертной конференции в сентябре, в настоящее время вызывают интерес у ДНК–аналитиков далеко за пределами Невады.
Среднестатистическому врачу необязательно знать, где ДНК донора будет находиться у пациента после трансплантации, так как этот тип химеризма вряд ли может быть вредным. Теоретически, это не должно изменить человека. "Их мозг и личность должны остаться прежними", — сказал д–р Эндрю Резвани, медицинский директор отделения стационарной пересадки крови и костного мозга медицинского центра Стэнфордского университета.
Он добавил, что иногда пациенты также спрашивают его, что значит для мужчины иметь женские хромосомы в крови или наоборот. "Это не имеет значения", — сказал он.
"Мы должны взять у вас подробный мазок, прежде чем вы сделаете эту процедуру, чтобы увидеть, как эта ДНК захватит ваше тело", — напомнила она свои слова.
Четыре года спустя, после долгой ремиссии и возвращения к работе, эксперимент Ромеро продолжился, при содействии ее коллег по криминалистической лаборатории. В течение четырех месяцев после процедуры кровь Лонга была заменена кровью его донора. Анализ мазков, собранных с его губ, щек и языка, показал, что они также содержали ДНК его донора, причем процентная доля увеличивалась и уменьшалась в течение этих лет. Из собранных образцов не изменились только волосы на груди и голове. Самым неожиданным было то, что через четыре года после процедуры ДНК его спермы была полностью заменена ДНК донора.
Бриттни Чилтон, криминалист отдела судебной медицины при шерифе, говорит, что если другой пациент отреагирует на трансплантацию аналогичным образом и это лицо совершит преступление, это может ввести в заблуждение следователей.
Уже был подобный прецедент, уточнила Чилтон. В 2004 году следователи на Аляске загрузили профиль ДНК, извлеченный из спермы, в базу данных криминальной ДНК. Он совпал с потенциальным подозреваемым. Но возникла проблема: во время нападения он находился в тюрьме. Оказалось, что ему пересадили костный мозг. Донор, его брат, был в конечном счете осужден.
Абирами Чидамбарам вела похожее дело на Аляске в 2005 году, когда она работала в государственной лаборатории по раскрытию научных преступлений. В нем участвовали полицейские следователи, которые скептически относились к рассказу жертвы сексуального насилия, поскольку, по ее словам, был один нападавший, хотя анализ ДНК показал, что их было два. В конце концов полиция установила, что второй профиль был получен от донора костного мозга.
Аналогичные сценарии могут также создать путаницу в отношении личности жертвы, и на самом деле, по словам Йонгбин Ома, приглашенного научного сотрудника Центра по идентификации человека при Университете Северного Техаса, такое бывало неоднократно. В 2008 году он пытался установить личность жертвы дорожно–транспортного происшествия для Национальной судебно–медицинской службы в Сеуле, Южная Корея. Кровь показала, что это была женщина. Но тело оказалось мужским, что было подтверждено ДНК в почке, а не в селезенке или легком, которые содержали мужскую и женскую ДНК. В конце концов, он узнал, что жертве был пересажен костный мозг его дочери.
Специфика ситуации Лонга вызывает неизбежный вопрос: Что будет, если у него будет ребенок? Передаст ли он гены своего донора или своего собственного будущим потомкам? В этом конкретном случае ответ получить не удастся, так как ему после рождения второго ребенка была сделана вазэктомия.
C тандартизованная технология
ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПУНКТАТА КОСТНОГО МОЗГА
Настоящая стандартизованная технология устанавливает единые требования при выполнении Цитологического исследования пунктата костного мозга в гематологических и клинико-диагностических лабораториях медицинских организаций
1. Цель исследования
Исследование клеточных элементов в мазке пунктата костного мозга (миелограмма), является одним из основных методов, который позволяет оценить процессы пролиферации и дифференцировки отдельных ростков кроветворения, его клеточный состав и функциональное состояние. Исследование пунктата костного мозга необходимо при диагностике различных гемобластозов, анемий, лизосомных болезней накопления, метастазов рака и других заболеваний [1].
Согласно ГОСТ Р ИСО15189 [2], стандартизация и соблюдение указанных правил позволит получить правильную информацию о результатах исследования пунктата костного мозга для ранней диагностики заболеваний, оценки эффективности проводимого лечения.
2. Требования к обеспечению выполнения технологии
Требования к специалистам и вспомогательному персоналу
Перечень специалистов с высшим и средним образованием, участвующих в выполнении технологии:
- врач клинической лабораторной диагностики;
- специалист со средним медицинским образованием.
Требования к образованию специалистов
Цитологическое исследование мазка пунктата костного мозга имеют право проводить врачи клинической лабораторной диагностики, прошедшие специализацию и повышение квалификации в установленном порядке и имеющие сертификат специалиста. Подготовительную работу выполняет специалист со средним медицинским образованием, имеющий соответствующий сертификат (медицинского технолога, медицинского лабораторного техника (фельдшера - лаборанта) или лаборанта.
Работа по выполнению указанной методики в лаборатории распределяется следующим образом:
персонал со средним медицинским образованием проводит: прием, регистрацию полученного биологического материала и мазков костного мозга; фиксацию и окрашивание мазков пунктата костного мозга, подсчет количества клеток в камерах, регистрацию заключения, архивирование препаратов;
врачи клинической лабораторной диагностики проводят исследование мазков костномозгового пунктата, описывают и оценивают миелограмму, делают заключение о характере патологического процесса.
Требования к знаниям и умениям специалистов должны соответствовать образовательным стандартам.
Требования к обеспечению безопасности труда медицинского персонала
Требования по безопасности труда при выполнении технологии соответствуют общим правилам безопасности при работе в клинико-диагностической лаборатории согласно ГОСТ Р ИСО 15190 [3]. Должны соблюдаться правила биологической безопасности, правила сбора и удаления отходов [4, 5], правила работы с электроприборами и реактивами, пожарной безопасности.
Материальные ресурсы, необходимые для выполнения технологии
Материальные ресурсы даны в расчете для проведения исследования препаратов костного мозга от одного больного (обследуемого), таблица 1.
Т а б л и ц а 1 - Материальные ресурсы для выполнения цитологического
исследования пунктата костного мозга
Количество
Не менее
Стеклянные изделия:
3. Характеристика выполнения цитологического исследования пунктата костного мозга
Технология исследования пунктата костного мозга включает следующие последовательные этапы:
- доставка, прием и регистрация биологического материала;
- фиксация и окрашивание мазков пунктата костного мозга;
- микроскопия: подсчет и исследование морфологии клеток костного мозга;
- оценка результатов подсчета и исследования морфологии клеток костного мозга;
- оценка правильности заключения (контроль качества цитологического исследования пунктата костного мозга);
- регистрация заключений и архивирование препаратов.
3.1. Доставка, прием и регистрация биологического материала
Во время транспортировки не допускается контакт предметного стекла (с нативным материалом) и бланка – направления, в соответствии с правилами биологической безопасности. Пробирки с пунктатом костного мозга и высушенные мазки доставляют в лабораторию в день взятия в специальных контейнерах.
П р и м е ч а н и е ¾ Если в лабораторию поступает пунктат с антикоагулянтом, материал немедленно регистрируют и передают лаборанту для приготовления мазков.
Сотрудник лаборатории, принимающий материал, должен проверить:
- правильность оформления направления: в бланке – направлении указываются данные обследуемого (ФИО, возраст, № истории болезни или амбулаторной карты, отделение, диагноз, проведенная терапия);
- маркировку мазков и пробирок с пунктатом костного мозга (на них должны быть нанесены код или фамилия больного, идентичные коду и фамилии в бланке направления материала для исследования).
Лаборант должен отметить количество мазков и пробирок в бланке - направлении и зарегистрировать получение материала в лабораторном журнале.
П р и м е ч а н и е ¾ Присланные для исследования препараты костного мозга: пунктат с гемолизирующим раствором и мазки - готовы к исследованию.
Фиксация и окрашивание мазков пунктата костного мозга
3.2.1 Общие правила фиксации и окрашивания мазков пунктата костного мозга:
- из доставленного в лабораторию пунктата с антикоагулянтом немедленно готовят 10-12 мазков; 20 мкл пунктата смешивают с 0,4 мл 3,5% раствора уксусной кислоты;
- из полученных или приготовленных непосредственно в лаборатории 10-12 мазков для цитологического исследования отбирают 3, их фиксируют, окрашивают и исследуют.
П р и м е ч а н и е ¾ Оставшиеся препараты предназначены для консультации у профильного специалиста в случае диагностических затруднений или, при наличии более 10% бластов, - для проведения цитохимических исследований в гематологической лаборатории. Эти препараты, нефиксированные и некрашеные, хранят при комнатной температуре не более 1.5 мес. При отсутствии необходимости в консультации или в цитохимическом исследовании, а особенно у первичных пациентов или при низкой клеточности пунктата, дополнительно обрабатывают и изучают все оставшиеся мазки.
- фиксация и окрашивание мазков пунктата костного мозга может выполняться вручную или автоматически с помощью специальных устройств, в которые загружаются нефиксированные мазки. Последующее автоматическое дозирование фиксатора-красителя и буферных растворов обеспечивает стандартную и равномерную окраску;
- вручную фиксация и окрашивание мазков пунктата костного мозга проводится аналогично фиксации и окрашиванию препаратов периферической крови.
- применение любой методики фиксации и окрашивания мазков требует точного соблюдения последовательности процедур при приготовлении растворов и временных промежутков в течение процесса фиксации и окрашивания.
Фиксация мазков выполняется либо как предварительный этап перед окрашиванием, либо одновременно с окрашиванием, если по технологии используются растворы готовых панхромных красителей.
Подготовительная работа для выполнения фиксации и окрашивания мазков состоит: в приготовлении буферного раствора, основных и рабочих растворов красителей, подготовке оборудования.
3.2.2 Методика фиксации и окрашивания мазков пунктата костного мозга по Нохту[3]
Для фиксации и окрашивания мазков необходимо приготовить следующие реактивы:
а) приготовление фосфатного буфера (рН 7,0). Для приготовления основного раствора фосфатного буфера необходимо приготовить навески следующих солей:
КН2РО4 (однозамещенного, безводного) - 0,49 г;
Nа2 НРО4 (двузамещенного, безводного) - 0,909 г;
Навески солей растворяют в дистиллированной воде, в объеме до 1000 мл.
П р и м е ч а н и е ¾ Для приготовления буферного раствора (рН 7,0) допустимо использование готовых форм (смеси фосфатных солей в виде таблеток, навесок).
б) приготовление основных и рабочего растворов красителей:
1) основной раствор азура ІІ: 1г краски растворяют в 1л дистиллированной воды. Оставляют в посуде из темного стекла на 12 -14 дней при комнатной температуре или в термостате при 37 о С на 6-8 дней;
2) основной раствор эозина калия: 1г краски растворяют в 1л дистиллированной воды. Оставляют в посуде из темного стекла на 12 -14 дней при комнатной температуре или в термостате при 37 о С на 6-8 дней;
3) рабочий раствор азур-эозина: перед окрашиванием мазков смешивают с 25 мл основного раствора азура ІІ, 20 мл основного раствора эозина калия и 55 мл буферного раствора. Пропорции красителей могут варьировать, их устанавливают опытным путем при приготовлении свежих основных растворов.
в) приготовление смеси Никифорова:
- смесь Никифорова готовится из этилового спирта (40 мл) и диэтилового эфира (40 мл) в пропорции 1:1. Смесь используется: для хранения чистых предметных стекол.
Фиксация мазков[4]
Реактив (краситель-фиксатор): раствор эозин-метиленового синего по Май-Грюнвальду или по Лейшману.
Оборудование: кювета для фиксации и окраски мазков со штативом-контейнером (или широкогорлая посуда с притертой пробкой).
- мазки помещают в штатив-контейнер и опускают его в кювету с фиксатором на 5мин.;
- вынимают контейнер из фиксирующего раствора.
Окрашивание мазков.
- химические стаканы низкие (для разведения красителей).
Реактивы:
- рабочий раствор азур–эозина;
- контейнер с фиксированными мазками переносят в кювету с рабочим раствором красителя (или фиксированные мазки располагают горизонтально на специальные рельсы и наливают по 3-4 мл красителя на каждый из препаратов), на 20 - 45 минут [5];
- смывают краску водопроводной водой;
- окрашенные и промытые мазки высушивают на воздухе в течение 15 –20 минут.
4.2.3 Методика окрашивания мазков пунктата костного мозга по Паппенгейму[6] [6].
Реактивы:
- раствор фиксатора-красителя по Май–Грюнвальду;
-раствор азур-эозина по Нохту или готовый краситель Романовского–Гимзы, разведенный фосфатным буфером в 10 - 20 раз;
- сухие нефиксированные мазки аккуратно помещают в штатив-контейнер для окраски мазков или располагают горизонтально на специальные рельсы;
- штатив-контейнер опускают в кювету с раствором фиксатора-красителя на 3 - 5 минут, или наливают по 3 - 4 мл фиксатора-красителя на каждый из препаратов, находящихся на рельсах;
- контейнер с мазками ополаскивают в кювете с дистиллированной водой в течение 1 минуты или на мазок, не сливая фиксатор-краситель, добавляют дистиллированную воду на 1 мин;
- помещают контейнер с мазками в кювету с рабочим раствором азур-эозиновой краски по Нохту (или по Романовскому-Гимзе) на 8 -10 минут или наливают краситель на мазки, находящиеся на рельсах;
- смывают краску водопроводной водой, мазки высушивают.
Читайте также:
